技術原理

技術原理 原位測序技術 (In Situ Sequencing,ISS) 依賴于雙連接和滾環(huán)擴增技術，它是以缺口靶向(Gap-targeted Sequencing) 或條形碼靶向 (Barcode-targeted Sequencing) 為測序策略，同時引入邊連接邊測序的化學原理（Sequencing-by-ligation Chemistry)，以滾環(huán)擴增產(chǎn)物為測序媒介進而在組織或細胞原位對RNA實現(xiàn)短片段測序的技術。

技術流程

(1)定制探針：針對用戶提供的基因的非保守區(qū)設計探針并合成

(2)樣本前處理：將冰凍切片退凍、固定、脫水和透化，以便探針和反應所需的酶等成分進入組織細胞內(nèi)部

(3)探針雜交與滾環(huán)擴增：探針與RNA雜交，之后連接成環(huán)；通過滾環(huán)擴增反應放大編碼信號

(4)原位成像：利用邊合成邊測序的化學原理，通過采集熒光信號得到對應位置的編碼堿基；經(jīng)過序列解碼，可識別出該位置靶向結合的基因

(5)圖像分析：獲得每個靶基因在組織中的空間表達位置，用不同符號(或顏色)標記在同一張組織圖像中；通過細胞邊界識別等方法得到單細胞水平的基因表達定量數(shù)據(jù)，可進行高級分析

產(chǎn)品優(yōu)勢

(1)高效、特異、高敏

(2)高信噪比

(3)可實現(xiàn)256種靶標分子檢測

(4)亞細胞分辨率

技術優(yōu)勢

數(shù)據(jù)分析

應用思路

應用場景

檢測結果展示